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離子交換色譜樹脂和方法

更新時(shí)間:2023-07-10      點(diǎn)擊次數(shù):1164

最常見的離子交換色譜 (IEX)樹脂類型有哪些?如何選擇適合預(yù)期應(yīng)用的樹脂?一般來說,樹脂可分為以下幾類:

  • 強(qiáng)酸性陽離子樹脂

  • 弱酸性陽離子樹脂

  • 強(qiáng)堿性陰離子樹脂

  • 弱堿性陰離子樹脂

  • 特種樹脂

強(qiáng)酸陽離子(SAC)交換樹脂包含連接有磺酸官能團(tuán)(例如,聚苯乙烯磺酸酯、聚AMP等)的聚合物基質(zhì)。 

弱酸陽離子 (WAC) 交換樹脂具有羧酸基團(tuán) (RCOO - ),對(duì)二價(jià)陽離子(Ca 2+和 Mg 2+ )具有高親和力。它們還具有很強(qiáng)的抗氧化性,并表現(xiàn)出機(jī)械耐久性。

強(qiáng)堿陰離子(SBA)交換樹脂可以去除樣品中的所有陰離子污染物(強(qiáng)酸如鹽酸和硫酸以及弱酸如硅和碳酸),并且與SAC樹脂相比具有顯著更高的再生效率。 

弱堿陰離子 (WBA) 交換樹脂通常具有伯氨基、仲氨基和叔氨基,可有效去除強(qiáng)無機(jī)酸的陰離子,但在去除碳酸根和二氧化硅離子方面效果不佳。這些樹脂不具有可交換離子,可以用氫氧化鈉、氨或碳酸鈉再生。

根據(jù)預(yù)期應(yīng)用,特種樹脂具有不同的官能團(tuán)(例如硫醇、氨基膦酸、亞氨基二乙酸等)。一些最常見的例子包括濃縮和去除稀溶液中金屬的螯合樹脂以及從水中吸附天然有機(jī)酸離子的磁性離子交換樹脂。

樹脂選擇:要考慮的因素

為特定應(yīng)用選擇合適的樹脂是確保純化過程的有效性和質(zhì)量的關(guān)鍵之一。以下是選擇 IEX 樹脂時(shí)需要考慮的一些因素。

等電點(diǎn)(pl)

pl 確定應(yīng)用是否需要陽離子或陰離子交換樹脂。當(dāng)使用穩(wěn)定高于或低于其 pl 的蛋白質(zhì)時(shí),使用哪種樹脂并不重要,因?yàn)閮烧叨伎梢院芎玫赝瓿晒ぷ?。然而,如果蛋白質(zhì)僅在其 pl 以上穩(wěn)定,請(qǐng)使用陰離子交換樹脂。  

酸堿度

無論緩沖液 pH 值如何,強(qiáng)離子交換劑都能保持電荷數(shù)量并表現(xiàn)相對(duì)良好。另一方面,弱陽離子交換劑和弱陰離子交換劑的容量分別在pH值低于6和高于pH值9時(shí)開始惡化。

樹脂的離子形式

改變柱平衡緩沖液會(huì)改變吸收到樹脂官能團(tuán)中的抗衡離子(例如陰離子交換劑的Na +和陽離子交換劑的Cl - )。由于不同的抗衡離子對(duì)給定樹脂表現(xiàn)出不同的親和力強(qiáng)度,因此選擇性較低的抗衡離子很容易與具有相似電荷的另一種離子交換。此外,含有對(duì)支持物選擇性較低的抗衡離子的洗脫緩沖液在洗脫過程中較不易置換蛋白質(zhì)。

樹脂粒徑

固體支持物的尺寸可能會(huì)影響分辨率,但不會(huì)影響樹脂的選擇性。較小的顆粒通常比較大的顆粒提供更高的分辨率,但可能需要較低的流速。因此,較小的顆粒用于小規(guī)模和分析工作,而較大的顆粒更適合制備和大規(guī)模工作。

流量

緩沖液通過樹脂的時(shí)間越長,分辨率和容量就越好,但可能會(huì)損害蛋白質(zhì)活性。為了獲得最佳結(jié)果,請(qǐng)使用具有最快流速的樹脂,以提供所需的分辨率和容量。  

動(dòng)態(tài)結(jié)合能力

這是指樹脂在給定流速下可以結(jié)合的蛋白質(zhì)的量。以 mg/ml 表示,當(dāng)需要快速流速來維持蛋白質(zhì)活性時(shí),該因素至關(guān)重要。

應(yīng)用領(lǐng)域 

離子交換色譜具有廣泛的應(yīng)用,包括:

  • 蛋白質(zhì)、血液成分的純化

  • 疫苗、抗體療法、基因療法和生物仿制藥等藥品的制造

  • 生物技術(shù)

  • 食品研究與制造

  • 水的軟化和凈化。

  • 直接從環(huán)境空氣中捕獲CO 2

  • 金屬分離純化 


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