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同種型對(duì)照抗體選擇和使用

更新時(shí)間:2023-07-31      點(diǎn)擊次數(shù):683

什么是同種型對(duì)照抗體?

選擇和使用正確的同種型對(duì)照抗體是所有體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的重要組成部分。這些抗體用作陰性對(duì)照——它們與主要靶向抗體的確切宿主物種、同種型和亞類相匹配,但對(duì)目標(biāo)生物體或物種中存在的蛋白質(zhì)沒有特異性。同型對(duì)照抗體被設(shè)計(jì)為在體內(nèi)動(dòng)物模型中不結(jié)合,但保留實(shí)驗(yàn)中使用的一抗的所有非特異性特征。

為什么在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中納入同型對(duì)照治療組很重要?

需要納入同種型對(duì)照治療組才能生成可靠的數(shù)據(jù),因?yàn)樗寡芯咳藛T能夠準(zhǔn)確地區(qū)分從一抗以抗原特異性方式結(jié)合觀察到的結(jié)果和從非抗原特異性結(jié)合或抗體注射的其他非特異性效應(yīng)觀察到的結(jié)果。

給予動(dòng)物的一抗可以與細(xì)胞上的 Fc 受體發(fā)生非抗原特異性相互作用,包括 B 細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、NK 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等。有時(shí) Fc 受體結(jié)合參與一抗的作用機(jī)制,例如抗體定向細(xì)胞毒性 (ADCC)。然而,非抗原特異性 Fc 受體結(jié)合可能導(dǎo)致可觀察到的與抗原特異性結(jié)合無(wú)關(guān)的生物效應(yīng)或表型。與一抗同種型和亞類相匹配的同種型對(duì)照抗體也將與 Fc 受體結(jié)合,從而使研究人員能夠控制這些效應(yīng)。

除了匹配同種型和亞類外,理想的同種型對(duì)照還必須與一抗的宿主物種匹配。許多用于小鼠模型體內(nèi)研究的一抗單克隆抗體是利用雜交瘤技術(shù)在大鼠或倉(cāng)鼠身上產(chǎn)生的。當(dāng)異種大鼠或倉(cāng)鼠 IgG 注射到小鼠體內(nèi)時(shí),可能會(huì)針對(duì)注射的抗體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。多次注射增加了這種可能性。與 Fc 受體結(jié)合一樣,這也可能導(dǎo)致與抗原特異性結(jié)合無(wú)關(guān)的可觀察表型。包括一組用與一抗宿主物種相匹配的同種型對(duì)照抗體治療的小鼠,使研究人員能夠控制這些非抗原特異性效應(yīng)。

有關(guān)同型對(duì)照的常見問題

  1. 可以使用未治療組或 PBS 治療組代替同型對(duì)照治療組嗎?

  2. 不建議使用未經(jīng)處理的組或 PBS 處理的組作為簡(jiǎn)化的陰性對(duì)照。必須使用同種型對(duì)照抗體來(lái)準(zhǔn)確區(qū)分由于一抗以抗原特異性方式結(jié)合而觀察到的結(jié)果和由于非抗原特異性結(jié)合或其他非特異性相互作用而觀察到的結(jié)果。

  3. 如果用不同宿主物種、同種型或亞類的多種一抗治療小鼠,對(duì)照組中的小鼠是否需要用多種同種型對(duì)照抗體治療,還是單一同種型對(duì)照抗體就足夠了?

由于抗體的宿主物種、同種型和亞類決定了其潛在的非特異性效應(yīng),因此同種型對(duì)照組必須與一抗處理組進(jìn)行相同的處理。例如,如果第一組注射大鼠 IgG2a 和大鼠 IgG2b 抗體,則同種型對(duì)照組也必須注射大鼠 IgG2a 和大鼠 IgG2b 抗體。

為什么選擇 Bio X Cell 同型對(duì)照抗體?

Bio X Cell 提供廣泛的同種型對(duì)照抗體,適用于體內(nèi)體外應(yīng)用。我們的同型對(duì)照具有:

  • 純度我們優(yōu)化的專有抗體制造方法可確保獲得超純抗體解決方案,無(wú)需添加蛋白質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)。使用 SDS-PAGE 對(duì)每批產(chǎn)品的純度進(jìn)行 QC 測(cè)試。

  • 超低內(nèi)毒素水平每個(gè)批次的內(nèi)毒素水平均經(jīng)過 QC 測(cè)試。我們的InVivo MAb 產(chǎn)品≤ 2EU/mg,InVivo Plus 產(chǎn)品≤ 1EU/mg。如果需要內(nèi)毒素水平低于 1EU/mg,請(qǐng)聯(lián)系我們的技術(shù)支持了解詳細(xì)信息。

  • 無(wú)病原體每批InVivo Plus 產(chǎn)品均經(jīng)過全面的鼠類病原體篩查。結(jié)果詳細(xì)記錄在特定產(chǎn)品的數(shù)據(jù)表中,以幫助您遵守 IACUC 和動(dòng)物設(shè)施的要求。

  • 低蛋白質(zhì)聚集我們專有的抗體制造方法可確??贵w解決方案的蛋白質(zhì)聚集水平非常低。此外,每批InVivo Plus 產(chǎn)品均經(jīng)過聚合水平 QC 測(cè)試,并保證低于總蛋白的 5%。

如何選擇合適的同型對(duì)照抗體?

同種型對(duì)照抗體必須與一抗的宿主物種、同種型和亞類相匹配。為了方便客戶,我們?cè)诿總€(gè)產(chǎn)品頁(yè)面上都包含了這些重要的產(chǎn)品信息以及所有一抗的推薦同型對(duì)照。下表是適用于體內(nèi)體外研究的 Bio X Cell 同型對(duì)照抗體的完整列表。

Armenian Hamster IgG Isotype Control, Anti-Glutathione S-TransferasePIPArmenian HamsterIgGBE0260N/A
Polyclonal Armenian Hamster IgGN/AArmenian HamsterIgGBE0091BP0091*
Polyclonal Goat IgGN/AGoatIgGBE0130N/A
Hamster IgG F(Ab')2 FragmentsHamster IgG F(Ab')2 FragmentsHamsterPolyclonalBE0091-FABN/A
Human IgG2 Isotype ControlN/AHumanIgG2, ΛBE0301BP0301*
Human IgG1 Isotype ControlN/AHumanIgG1, ΚBE0297BP0297*
Polyclonal Human IgGN/AHumanIgGBE0092N/A
Mouse IgG2c Isotype Control, Anti-Dengue VirusDV5-1MouseIgG2c, ΚBE0366N/A
Mouse IgG1 Isotype Control, Unknown SpecificityMOPC-21MouseIgG1, ΚBE0083BP0083*
Mouse IgG2a Isotype Control, Unknown SpecificityC1.18.4MouseIgG2a, ΚBE0085BP0085*
Mouse IgG2b Isotype Control, Unknown SpecificityMPC-11MouseIgG2b, ΚBE0086BP0086*
Polyclonal Mouse IgGN/AMouseIgGBE0093N/A
Polyclonal Rabbit IgGN/ARabbitIgGBE0095N/A
Rat IgG1 Isotype Control, Anti-TrinitrophenolTNP6A7RatIgG1, ΛBE0290BP0290*
Rat IgG1 Isotype Control, Anti-Horseradish PeroxidaseHRPNRatIgG1, ΚBE0088BP0088*
Rat IgG2a Isotype Control, Anti-Trinitrophenol2A3RatIgG2a, ΚBE0089BP0089*
Rat IgG2b Isotype Control, Anti-Keyhole Limpet HemocyaninLTF-2RatIgG2b, ΚBE0090BP0090*
Polyclonal Rat IgGN/ARatIgGBE0094N/A
Polyclonal Syrian Hamster IgGN/ASyrian HamsterIgGBE0087BP0087*



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