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熒光染料的介紹和應(yīng)用

更新時間:2023-08-25      點擊次數(shù):1383

熒光染料是指吸收一定波長的光波并發(fā)射出比所吸收的光波長更大的另一種光波的物質(zhì)。它們大多是含有苯環(huán)或具有共軛雙鍵的雜環(huán)的化合物。熒光染料可以單獨使用,也可以組合成復(fù)合熒光染料。

熒光標(biāo)記是將熒光染料(熒光團或熒光素)選擇性共價結(jié)合或物理吸附在待研究分子(蛋白質(zhì)、多肽等)的某一基團上的方法。利用其熒光特性提供有關(guān)所研究物體的信息。

研究應(yīng)用:

熒光染料由于靈敏度高、操作方便,已逐漸取代放射性同位素作為檢測標(biāo)記物,廣泛應(yīng)用于熒光免疫學(xué)、熒光探針、細(xì)胞染色等領(lǐng)域。包括特異性DNA染色,用于染色體分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等相關(guān)研究。許多其他核酸染料是多色染色系統(tǒng)中有用的復(fù)染劑,可作為背景對照,標(biāo)記細(xì)胞核,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的空間關(guān)系一目了然。

免疫分析

熒光標(biāo)記單克隆抗體技術(shù)為流式細(xì)胞術(shù)在細(xì)胞膜及細(xì)胞內(nèi)各種功能抗原、腫瘤基因蛋白等領(lǐng)域的研究拓展了無限的應(yīng)用空間。熒光探針可以通過蛋白質(zhì)交聯(lián)劑與單克隆抗體共價結(jié)合。免疫熒光標(biāo)記常用的染料是異硫氰酸熒光素 (FITC)、藻紅蛋白 (PE) 和 AlexaFluor 系列染料。

核酸擴增檢測

核酸熒光染料對細(xì)胞核進行染色,定量測定細(xì)胞發(fā)出的熒光強度,從而可以測定細(xì)胞核中DNA和RNA的含量,分析細(xì)胞周期和細(xì)胞增殖情況。有多種熒光染料可以對細(xì)胞中的 DNA 或 RNA 進行染色。常用的DNA染料有碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst 33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。

染料介紹:

APDye Fluor 647(Alexa Fluor 647 等效物;AF647)是一種明亮的綠色熒光染料,適合與 633、650 nm 氬激光配合使用。該染料是水溶性的,并且在 pH 4 至 pH 10 范圍內(nèi)對 pH 值不敏感。該染料具有 4 個磺酸鹽基團,使其水溶性高,在水溶液中聚集較少。 APDye Fluor 647 用于蛋白質(zhì)和抗體標(biāo)記,或高標(biāo)記密度的核酸應(yīng)用。您可能對Alexa 647 nhs 酯感興趣,點擊了解更多信息。

APDye Fluor 647 在結(jié)構(gòu)上與 Alexa Fluor 647 相似,并且光譜與 Cy5 Dye、Alexa Fluor 647、CF 647 Dye 或任何其他基于 Cyanine5 的熒光染料幾乎相同。


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