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定量蛋白質(zhì)印跡介紹

更新時間:2023-08-29      點擊次數(shù):558

什么是定量蛋白質(zhì)印跡?

定量蛋白質(zhì)印跡使不同治療之間的相對比較成為可能。定量蛋白質(zhì)印跡的目標(biāo)是準(zhǔn)確測量蛋白質(zhì)表達的變化。

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蛋白質(zhì)印跡用途

  • 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用

  • 信號通路

  • 翻譯后修飾

  • 細胞表面蛋白

  • RNAi分析

為什么我們需要定量蛋白質(zhì)印跡?

改變生活的療法。農(nóng)作物產(chǎn)量增加。我們所有人都希望通過我們一生的工作做出改變。定量西部片可以成為推進發(fā)現(xiàn)并使世界變得更美好的強大工具。

呈現(xiàn)最佳印跡

科學(xué)出版商、資助機構(gòu)以及生物技術(shù)和制藥公司對定量蛋白質(zhì)印跡感興趣。近年來,發(fā)表蛋白質(zhì)印跡的期刊標(biāo)準(zhǔn)變得更加嚴格。5 , 6 , 7 , 8 , 9 了解西方人的理論和技術(shù)對于獲得準(zhǔn)確的蛋白質(zhì)定量非常重要。有了更多可信的數(shù)據(jù),我們就能為未來奠定堅實的基礎(chǔ)。

定量蛋白質(zhì)印跡要求

  • 信號與加載的蛋白質(zhì)量成正比。

  • 感興趣的蛋白質(zhì)(或“目標(biāo)")在檢測的線性范圍內(nèi)進行定量。

  • 內(nèi)部上樣控制可糾正樣品制備、上樣和轉(zhuǎn)移過程中不可避免的變化。

除了這些要求外,實驗變異性還應(yīng)保持較低,以便可實現(xiàn)復(fù)制。

對于定量分析,您必須驗證幾個條件。條帶強度的差異可能是由實驗變異性(如使用不同的抗體或阻斷劑)或真正的生物學(xué)變化引起的。在設(shè)計實驗之前,確定蛋白質(zhì)印跡過程中變異的來源以及如何最好地控制它們非常重要。

什么是可變性?

您的結(jié)論將始終基于(并受到)實驗中的變異量的影響。您可以使用 CV(變異系數(shù))、σ(標(biāo)準(zhǔn)差)、r 2(決定系數(shù))或其他全方式來定義或測量變異性。減少變異性是最大限度提高精度的關(guān)鍵。

確定實驗結(jié)果的重要性是定量西方學(xué)者普遍關(guān)心的問題。一種方法是定義已處理和未處理樣本之間頻帶信號的百分比變化。實驗變化需要大于您對變異性的測量,例如 CV。因此,為了對微小的變化更有信心,請降低實驗中的 CV。說起來容易做起來難,對吧?為了始終如一地獲得準(zhǔn)確的答案,請盡可能消除錯誤源。



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