細(xì)胞計數(shù)是一種需要多種不同技術(shù)可供選擇的程序，其中大多數(shù)技術(shù)都依賴于專門的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。盡管現(xiàn)代生命科學(xué)應(yīng)用可用的細(xì)胞計數(shù)儀多種多樣，但它們通?？煞譃閮蓚€子組之一：手動和自動細(xì)胞計數(shù)儀。

手動細(xì)胞計數(shù)儀

血球計數(shù)器是手動細(xì)胞計數(shù)中常用的載玻片類型。載玻片包含一個腔室，下表面帶有蝕刻網(wǎng)格。該設(shè)備最初是為血液樣本分析而開發(fā)的，但現(xiàn)在廣泛用于各種哺乳動物細(xì)胞的細(xì)胞計數(shù)和活力分析。

顯微鏡載玻片包含兩個獨(dú)立的計數(shù)室，這些計數(shù)室蝕刻有精確尺寸的精確網(wǎng)格。將蓋玻片放置在載玻片頂部以形成計數(shù)室的頂部，將深度設(shè)置為已知高度。然后可以輕松計算體積。

可以在有或沒有染色的情況下進(jìn)行手動細(xì)胞計數(shù)。對于活力評估，通常使用臺盼藍(lán)等排阻染料。將細(xì)胞與染料混合并孵育，然后移液到測量室中。

一旦樣品通過毛細(xì)管作用填充計數(shù)室，就可以使用顯微鏡直接觀察細(xì)胞，并在網(wǎng)格上的特定扇區(qū)進(jìn)行計數(shù)。盡管臺盼藍(lán)被廣泛用作一種方法，但在評估細(xì)胞活力方面存在許多有據(jù)可查的限制。臺盼藍(lán)用于計數(shù)死細(xì)胞;染料被排除在膜完整的細(xì)胞之外，因此只有死細(xì)胞被染成藍(lán)色。該過程復(fù)雜，細(xì)胞顏色通常難以解釋。因此，這個過程是非常主觀的。它還對細(xì)胞有毒，導(dǎo)致活力發(fā)生變化，這與樣本的健康狀況無關(guān)。

手動細(xì)胞計數(shù)儀的優(yōu)點(diǎn)是初始購買價格低和持續(xù)運(yùn)營成本，尤其是考慮到使用帶有一次性塑料載玻片的自動細(xì)胞儀的成本大幅增加時。

手動細(xì)胞計數(shù)的主要缺點(diǎn)是：

• 主觀性：它需要人工解釋什么是細(xì)胞并評估活/死細(xì)胞，導(dǎo)致作員之間的錯誤率很高。

• 慢速：計數(shù)和記錄大量細(xì)胞是一個費(fèi)力、耗時的過程，需要對相對少量的細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)。血球計數(shù)器必須在樣品之間清潔干凈。

• 體積誤差：移液誤差和蓋玻片選址不當(dāng)會導(dǎo)致測量不準(zhǔn)確。

自動細(xì)胞計數(shù)儀

現(xiàn)有的自動細(xì)胞計數(shù)儀的優(yōu)勢在于，在很大程度上消除了細(xì)胞計數(shù)工作流程中的人類主觀性。它們通常也比手動計數(shù)更快，并且可以計數(shù)更多的細(xì)胞，從而提高統(tǒng)計準(zhǔn)確性。然而，由于一次性塑料載玻片或耗材的持續(xù)成本很高，他們通常無法證明細(xì)胞計數(shù)和活力分析的成本是合理的。DeNovix 開發(fā)了一種專有技術(shù)，無需一次性塑料載玻片即可進(jìn)行超精密細(xì)胞計數(shù)和活力檢測。這項(xiàng)創(chuàng)新將手動細(xì)胞計數(shù)的低成本與自動計數(shù)的高速和高精度相結(jié)合。

DeNovix 的 CellDrop™ 細(xì)胞計數(shù)儀

CellDrop自動細(xì)胞計數(shù)儀具有一個可變高度的樣品室，由兩個一直、平行的光學(xué)藍(lán)寶石表面形成。通過高精度內(nèi)部機(jī)構(gòu)，這些表面可以調(diào)整以形成具有精確高度的樣品室，從而消除了體積誤差的風(fēng)險。 DirectPipette™技術(shù)同時解決了手動細(xì)胞計數(shù)儀的準(zhǔn)確性問題以及上一代自動細(xì)胞計數(shù)儀的成本低下和對環(huán)境的影響。然而，CellDropseries 的優(yōu)勢不僅限于細(xì)胞計數(shù)的準(zhǔn)備階段。它配備了明場和雙熒光功能，能夠通過更具選擇性和精確的分析方法以及簡單的臺盼藍(lán)細(xì)胞活力評估來詢問樣品。