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條件細(xì)胞培養(yǎng)基簡介

更新時(shí)間:2023-09-06      點(diǎn)擊次數(shù):854

什么是條件媒體?

培養(yǎng)的細(xì)胞通常需要添加特定的生長因子以實(shí)現(xiàn)增殖、分化或存活。然而,一些重組蛋白的使用成本昂貴。這要么是因?yàn)樗鼈冸y以制造(因此成本高昂),要么是因?yàn)樗鼈冃枰罅俊?/span>

生產(chǎn)純化重組蛋白的大部分成本是純化步驟。然而,如果重組蛋白由生產(chǎn)細(xì)胞分泌到周圍介質(zhì)中,則可以避免純化。為了使細(xì)胞培養(yǎng)變得經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,許多研究人員選擇通過將培養(yǎng)基與生產(chǎn)細(xì)胞一起孵育,將這些重組蛋白直接添加到細(xì)胞培養(yǎng)基中。在用生長因子調(diào)節(jié)培養(yǎng)基后,可以立即將其儲(chǔ)存或轉(zhuǎn)移到需要它的感興趣的細(xì)胞上。這種含有細(xì)胞分泌的成分且另一組細(xì)胞需要的成分的培養(yǎng)基稱為條件培養(yǎng)基。

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Wnt-3a 和 R-Spondin 1 經(jīng)常通過調(diào)節(jié)添加到培養(yǎng)基中。重組 Wnt-3a 很難制備,因此價(jià)格昂貴。 R-Spondin 1 并不昂貴,但細(xì)胞培養(yǎng)中通常需要高濃度 (0.5-1.0 ug/ml),這意味著需要大量使用。

考慮到經(jīng)濟(jì)上可行的重組蛋白替代品,花費(fèi)數(shù)小時(shí)培養(yǎng)細(xì)胞和分析條件培養(yǎng)基的科學(xué)家可能會(huì)改變選擇。此外,使用這種方法增加了另一個(gè)變量,因?yàn)橛糜谡{(diào)節(jié)培養(yǎng)基的細(xì)胞會(huì)將代謝物分泌到培養(yǎng)基中并耗盡營養(yǎng)物質(zhì)。實(shí)際上,接受培養(yǎng)基的細(xì)胞正在獲得二手培養(yǎng)基,盡管分泌的生長因子有所改善。

那么有沒有更好的解決方案呢?增長因子成本的部分驅(qū)動(dòng)因素是浪費(fèi)。添加到培養(yǎng)基中的大部分生長因子在到達(dá)細(xì)胞之前就會(huì)降解。對于 3D 培養(yǎng)物來說,這個(gè)問題尤其嚴(yán)重,因?yàn)榧?xì)胞被保存在水凝膠中,生長因子無法有效遷移。在 CellGS,我們一直與美國、歐洲和亞洲的實(shí)驗(yàn)室合作,研究 PODS的使用 ,以提供更低成本、更有效的條件培養(yǎng)基替代品。

PODS在細(xì)胞附近緩慢釋放蛋白質(zhì),從而減少了需要添加的生長因子的頻率,并使可用性曲線變平,減少了細(xì)胞的壓力,從而提高了細(xì)胞的質(zhì)量。



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