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當前位置:首頁 > 產品中心 > 實驗試劑 > 試劑盒 > K61009MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit

MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit

簡要描述:MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit
MagVigen唾液DNA提取試劑盒

  • 產品型號:K61009
  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2024-08-21
  • 訪  問  量:493

詳細介紹

品牌其他品牌貨號K61009
供貨周期現(xiàn)貨應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥

MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit


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產品內容

  • MagVigen唾液DNA捕獲納米顆粒
  • 唾液溶解緩沖液
  • 蛋白酶K
  • 蛋白酶K緩沖液
  • 清洗緩沖液1原液
  • 洗脫緩沖液

所需材料

  • 異丙醇
  • 乙醇
  • 十二烷基硫酸鈉,16%
  • 磁性架(NVIGEN目錄號A20006)

注意:
MagVigen唾液DNA捕獲試劑盒(K61009)可以從唾液樣本中捕獲DNA (>30bp)。

協(xié)議

  1. 準備唾液樣本:如果使用冷凍唾液,在室溫下融化。將唾液以10000x離心10分鐘,以去除任何沉淀。

  2. 制備裂解緩沖液:如果有固體,在60℃加熱幾分鐘,形成澄清溶液。

  3. 制備蛋白酶溶液:向蛋白酶K小瓶中加入蛋白酶K緩沖液。渦旋混合均勻。儲存于-20°c

  4. 準備清洗緩沖液1:根據表1計算所需的量。向每550 μl清洗緩沖液1儲備液中添加450 μl異丙醇。每次都要做緩沖。

  5. 檢查表1中的試劑使用情況。

  6. 將蛋白酶K溶液加入樣品管底部,將320 μl唾液樣品加入管中,將80μl 1x PBS加入管中。渦旋5秒鐘,以充分混合,短暫旋轉。

  7. 向試管中加入16% SDS。渦旋5秒鐘,以充分混合,短暫旋轉。

  8. 向試管中加入唾液溶解緩沖液。渦旋1分鐘以充分混合。短暫降速。在60°C的水浴中孵育30分鐘。

  9. 添加MagVigen唾液DNA捕獲納米顆粒。輕輕搖動小瓶使其分散。然后加入異丙醇,渦旋混合均勻,短暫減速,并保持低速至中速渦旋45分鐘。

  10. 將反應管放在磁性架上,沉淀珠子,直到溶液澄清(大約10分鐘,取決于磁體的強度和樣品體積)。

  11. 慢慢去除上層清液。注意不要拿走任何珠子,盡可能多地取出溶液。輕敲固體表面上的磁性架,使殘留溶液沉淀到試管底部,去除所有上清液。

  12. 從磁鐵上取下試管,加入清洗緩沖液1。通過移液或渦旋混合。短暫降速。在磁性架上沉淀珠子(約10分鐘),去除上清液。在表面上輕敲磁架。除去所有上清液。


    注意:

    不需要*全分散珠子。用移液器吸頭盡可能分散就可以了。

  13. 使用80%的乙醇清洗珠子沉淀。不需要*全分散珠粒。稍微向前和向后傾斜磁性架,使樣本管留在磁性架上。然后短暫旋轉,使蓋子中沒有溶液殘留。在磁性架上沉淀珠子(約3分鐘),并去除所有上清液。輕敲固體表面上的磁性架,將上清液殘渣沉淀到試管底部。除去所有上清液。

  14. 使用80%乙醇再次清洗珠子沉淀。沉淀珠子(~ 2-3分鐘)并去除所有上清液。

  15. 將試管留在磁性架上,風干沉淀以蒸發(fā)所有乙醇。這需要2-3分鐘。

  16. 向珠子中加入所需量的洗脫緩沖液,上下吸取,直到所有沉淀*全重新分散。將珠子分散在洗脫緩沖液中3分鐘。

  17. 短暫降速。然后將試管放在磁性支架上5分鐘。

  18. 在不干擾磁珠沉淀的情況下收集上清液。上清液含有提取的DNA。移出DNA溶液進行下游實驗時,將試管放在磁鐵旁邊。如果不立即使用,提取的DNA溶液可以儲存在-20℃下。

表1。每個步驟中使用的試劑體積。

試劑微升
蛋白酶K6
唾液320
1X PBS80
SDS (16%)25
裂解緩沖液190
磁珠28
異丙醇480
清洗緩沖液1160
清洗緩沖液2 / 3 (80%乙醇)160
洗脫示例40
總體積1.2毫升


MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit







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